Plasmide Double Nickase (h) L-serine dehydratase: sc-408194-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) L-serine dehydratase correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide L-serine dehydratase Double Nickase (h) et le plasmide L-serine dehydratase Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SDS. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) L-serine dehydratase | sc-408194-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) L-serine dehydratase | sc-408194-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **SDS** code la **L‑sérine déshydratase**, une enzyme dépendante du **phosphate de pyridoxal** qui catalyse la désamination de la **L‑sérine** en **pyruvate** et **ammoniac**, reliant ainsi le catabolisme de la sérine au métabolisme central du carbone et à l’équilibre azoté cellulaire. En modulant la disponibilité des unités **monocarbonées** dérivées de la sérine et l’apport en pyruvate, l’activité de SDS s’inscrit à l’interface du métabolisme des acides aminés, de l’homéostasie rédox et des voies bioénergétiques. Une régulation altérée de l’utilisation de la sérine est fréquemment étudiée dans des contextes où le remodelage métabolique influence la prolifération, l’adaptation au stress et les programmes de différenciation. Par conséquent, SDS constitue un point d’entrée utile pour explorer comment les flux d’acides aminés affectent les réseaux biosynthétiques et de signalisation en aval dans les cellules humaines.
L-serine dehydratase Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SDS dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SDS. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SDS. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SDS.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.