L-Myc Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401836

Descripción general

MYCL codifica L-Myc, un factor de transcripción de hélice–bucle–hélice básica con cremallera de leucina de la familia MYC que forma heterodímeros con MAX para regular la expresión génica impulsada por la ARN polimerasa II. L-Myc influye en la progresión del ciclo celular, la biogénesis ribosomal, la reprogramación metabólica y el control transcripcional asociado a la cromatina, integrando señales a través de programas de proliferación y diferenciación. La actividad de MYCL se solapa con la dinámica de la red MYC/MAX y puede modular la transcripción dependiente de E2F y las respuestas apoptóticas al estrés según el contexto celular. La desregulación o amplificación de MYCL se asocia con programas transcripcionales oncogénicos en determinados tipos de tumores, lo que lo convierte en un nodo útil para estudiar el control del crecimiento asociado al linaje y los circuitos de factores de transcripción.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO L-Myc (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen MYCL en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del MYCL junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de MYCL tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína L-Myc.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en MYCL para la investigación de la señalización de L-Myc, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de MYCL críticos para la función de L-Myc
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de MYCL para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido L-Myc CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido L-Myc CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus MYCL. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR L-Myc (h) y el plásmido HDR L-Myc (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología MYCL para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana MYCL definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.