KV4.3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404247-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- KV4.3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase KV4.3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase KV4.3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para KCND3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
KV4.3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404247-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
KV4.3 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404247-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O KCND3 humano codifica a subunidade do canal de potássio dependente de voltagem KV4.3, um mediador principal das correntes de K+ do tipo A, de inativação rápida, que moldam a repolarização do potencial de ação e regulam a frequência de disparo em células excitáveis. A atividade do KV4.3 integra-se a programas de excitabilidade de membrana que acoplam a condutância iônica à sinalização por Ca2+, à transmissão sináptica e à expressão gênica dependente de atividade. No sistema nervoso, o KCND3 contribui para o marcapasso neuronal e o processamento de sinais dendríticos, e variantes foram associadas a distúrbios de excitabilidade, incluindo ataxia espinocerebelar e fenótipos de arritmia cardíaca. Essas características tornam o KCND3 um alvo útil para estudar mecanismos de sinalização elétrica, biofísica de canais e relações genótipo–fenótipo em modelos celulares relevantes para doenças.
KV4.3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus KCND3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de KCND3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função KCND3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com KCND3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.