KRTAP14 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423901

Descripción general

Krtap14 codifica la proteína 14 asociada a queratina, un pequeño componente estructural rico en cisteína de la matriz del tallo piloso en el ratón, que contribuye a la resistencia mecánica y al entrecruzamiento de los filamentos intermedios de queratina. KRTAP14 participa en programas de diferenciación terminal de los queratinocitos del folículo piloso y se integra en procesos que regulan el ensamblaje de la fibra capilar, la organización de la cutícula y la corteza, y la estabilización mediada por enlaces disulfuro. La alteración de la expresión o la variación estructural de las proteínas asociadas a queratina se ha vinculado con cambios en la textura del pelo y con fenotipos de fragilidad, lo que hace que Krtap14 sea relevante para estudiar la integridad del tallo piloso y la biología folicular. Su expresión suele considerarse junto con redes de queratinización y vías asociadas al complejo de diferenciación epidérmica que modelan la formación de anexos cutáneos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO KRTAP14 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Krtap14 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Krtap14 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Krtap14 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína KRTAP14.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Krtap14 para la investigación de la señalización de KRTAP14, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Krtap14 críticos para la función de KRTAP14
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Krtap14 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido KRTAP14 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido KRTAP14 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Krtap14. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR KRTAP14 (m) y el plásmido HDR KRTAP14 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Krtap14 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Krtap14 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.