Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Kremen-1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403791
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Kremen-1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Kremen-1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Kremen-1 Anticuerpo (R17-2): sc-74206
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Kremen-1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403791 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
KREMEN1 codifica Kremen-1, un receptor transmembrana de paso único conocido principalmente por ser un socio de unión de alta afinidad de las proteínas Dickkopf (DKK) que modula la señalización canónica Wnt/β-catenina. Al formar complejos con LRP5/6 y DKK1, Kremen-1 favorece la internalización del receptor y atenúa los programas transcripcionales impulsados por Wnt que controlan decisiones de destino celular, proliferación y homeostasis tisular. A través de esta conexión de vías, KREMEN1 se ha estudiado en contextos en los que el desequilibrio de la vía Wnt contribuye a fenotipos del desarrollo y a la reprogramación de la señalización asociada a enfermedades, incluidos ámbitos de investigación relacionados con el cáncer y con el tejido óseo. Su localización en membrana y sus interacciones receptor–ligando también lo hacen útil para analizar el diálogo cruzado entre vías en la superficie celular y la regulación génica dependiente de β-catenina aguas abajo.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Kremen-1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen KREMEN1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del KREMEN1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de KREMEN1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Kremen-1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en KREMEN1 para la investigación de la señalización de Kremen-1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de KREMEN1 críticos para la función de Kremen-1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de KREMEN1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Kremen-1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Kremen-1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus KREMEN1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Kremen-1 (h) y el plásmido HDR Kremen-1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología KREMEN1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana KREMEN1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.