Plasmide Double Nickase (h) KLHDC2: sc-411772-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) KLHDC2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide KLHDC2 Double Nickase (h) et le plasmide KLHDC2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant KLHDC2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) KLHDC2 | sc-411772-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) KLHDC2 | sc-411772-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KLHDC2 code la protéine 2 contenant un domaine Kelch, un récepteur de substrats du complexe ubiquitine ligase E3 de type Cullin‑RING, qui contribue au renouvellement des protéines dépendant de l’ubiquitine. En reconnaissant de manière sélective des substrats protéiques, KLHDC2 aide à réguler la protéostasie et des processus cellulaires en aval tels que les réponses au stress et la signalisation associée au cycle cellulaire. Une activité altérée des composants de la voie ubiquitine‑protéasome peut perturber des réseaux de signalisation qui influencent la prolifération et la survie, faisant de KLHDC2 un nœud utile pour étudier les programmes de dégradation protéique dérégulés. KLHDC2 est donc pertinent pour la recherche mécanistique sur des voies liées à la signalisation oncogénique, à la stabilité du génome et à l’adaptation cellulaire au stress protéotoxique.
KLHDC2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus KLHDC2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de KLHDC2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de KLHDC2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de KLHDC2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.