KIR2.1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-401974

개요

KCNJ2는 인간의 내향 정류성 칼륨 채널인 Kir2.1을 암호화하며, 이는 심장 및 골격근의 안정막전위(resting membrane potential)와 흥분성을 결정하는 핵심 인자입니다. Kir2.1은 종말 재분극(terminal repolarization)을 안정화하고 활동전위 파형을 형성하는 IK1 전류를 전도하며, 막 수송(membrane trafficking) 및 PIP2 의존적 게이팅 과정과 통합적으로 작용합니다. KCNJ2 기능의 변화는 안데르센–타윌 증후군(Andersen–Tawil syndrome)과 같은 채널병증(channelopathy) 표현형과 연관되며, 흥분성 조직에서 부정맥 감수성, 주기성 마비, 발달 신호전달에도 영향을 줄 수 있습니다. 세포 모델에서 Kir2.1 활성은 전기생리학적 항상성, 칼슘 처리(calcium handling), 그리고 막전위 의존적 유전자 발현 조절과 교차적으로 연결됩니다.

KIR2.1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 KCNJ2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 KCNJ2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 KCNJ2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 KIR2.1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 KIR2.1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 KCNJ2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• KIR2.1 기능에 중요한 KCNJ2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 KCNJ2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• KIR2.1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 KIR2.1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 KCNJ2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  KIR2.1 HDR 플라스미드 (h) 및 KIR2.1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 KCNJ2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 KCNJ2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.