KIF4A CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-411788

개요

KIF4A는 미세소관과 염색질에 결합하는 키네신 계열의 모터 단백질을 암호화하며, 유사분열 방추체의 조직화, 염색체 응축, 후기(anafase) 분리를 조율합니다. 또한 세포질분열과 방추체 중간대(midzone) 역학 조절을 포함한 핵심 세포주기 과정에서 기능하여, 증식성 분열 동안 유전체가 정확히 분배되도록 뒷받침합니다. KIF4A의 활성은 유전체 안정성과 복제 스트레스 결과에 영향을 미치는 DNA 손상 반응 및 염색질 리모델링 경로와도 교차합니다. KIF4A 발현 조절 이상은 여러 암 연구 맥락에서 관찰되는 증식성 표현형 및 유전체 불안정성 시그니처와 연관되어 있어, 유사분열 관련 취약성의 기전을 연구하기 위한 중요한 표적입니다.

KIF4A CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 KIF4A 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 KIF4A 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 KIF4A의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 KIF4A 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 KIF4A 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 KIF4A 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• KIF4A 기능에 중요한 KIF4A 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 KIF4A 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• KIF4A CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 KIF4A CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 KIF4A 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  KIF4A HDR 플라스미드 (h) 및 KIF4A HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 KIF4A 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 KIF4A 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.