Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
KIF3A Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403463
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- KIF3A El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico KIF3A, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: KIF3A Anticuerpo (E-5): sc-376680
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
KIF3A Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403463 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
KIF3A codifica una subunidad motora de kinesina-2 que, junto con KIF3B y KAP3, impulsa el transporte anterógrado basado en microtúbulos, necesario para el ensamblaje del cilio primario y el transporte intraflagelar. A través de su función en la ciliogénesis, KIF3A sostiene vías de transducción de señales dependientes del cilio, incluidas Hedgehog y Wnt, influyendo en la polaridad celular, la diferenciación y la homeostasis tisular. La alteración de la función de KIF3A se asocia con fenotipos relacionados con los cilios y se ha estudiado en contextos como anomalías del desarrollo y desregulación de la señalización. En sistemas celulares humanos, la pérdida de KIF3A se utiliza comúnmente para investigar el tráfico ciliar, la localización de receptores y las respuestas transcripcionales aguas abajo.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO KIF3A (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen KIF3A en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del KIF3A junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de KIF3A tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína KIF3A.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en KIF3A para la investigación de la señalización de KIF3A, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de KIF3A críticos para la función de KIF3A
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de KIF3A para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido KIF3A CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido KIF3A CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus KIF3A. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR KIF3A (h) y el plásmido HDR KIF3A (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología KIF3A para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana KIF3A definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.