Plásmido Doble Nickase (h) KIAA0664: sc-407383-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)KIAA0664 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa KIAA0664 (h) y el plásmido de doble nickasa KIAA0664 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CLUH. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) KIAA0664 | sc-407383-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) KIAA0664 | sc-407383-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CLUH humano (KIAA0664) codifica una proteína citosólica de unión a ARN que coordina la biogénesis mitocondrial al regular la localización, la estabilidad y la traducción de ARNm codificados en el núcleo para proteínas mitocondriales. CLUH sostiene la capacidad de fosforilación oxidativa y la distribución mitocondrial al acoplar el control postranscripcional con la dinámica de los orgánulos, lo que ayuda a mantener la homeostasis energética durante la proliferación y las respuestas al estrés. La alteración de la regulación de ARNm dependiente de CLUH puede modificar la morfología mitocondrial, la función de la cadena respiratoria y el metabolismo celular, procesos que se investigan con frecuencia en estudios de neurodegeneración, disfunción cardiometabólica y bioenergética de células cancerosas. Como nodo de gránulos de ARN asociados a mitocondrias, KIAA0664 también se utiliza para explorar los vínculos entre el metabolismo del ARN, la proteostasis y las vías de control de calidad mitocondrial.
KIAA0664 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CLUH en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CLUH. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CLUH. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CLUH alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.