Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) Ki67: sc-400081-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Ki67 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Ki67 Double Nickase (h) et le plasmide Ki67 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant MKI67. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Ki67 Antibody (Ki-67): sc-23900
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Ki67 | sc-400081-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Ki67 | sc-400081-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MKI67 code Ki67, une protéine nucléaire associée à la chromatine, largement utilisée comme marqueur de la prolifération cellulaire active. Son expression culmine pendant les phases S/G2/M et est absente dans les cellules quiescentes en G0. Ki67 contribue à l'organisation des chromosomes à un niveau supérieur et favorise la formation de la périphérie des chromosomes mitotiques, aidant à maintenir une ségrégation chromosomique correcte et une dynamique appropriée de division cellulaire. Du fait de son couplage étroit aux programmes de prolifération, Ki67 s'inscrit dans les réseaux de régulation du cycle cellulaire et est fréquemment exploitée pour étudier le contrôle de la croissance et les réponses au stress de réplication. Une expression dérégulée de MKI67 est couramment associée à des états d'hyperprolifération dans de nombreux types de tumeurs, ce qui soutient son intérêt pour les études mécanistiques du contrôle du cycle cellulaire et de la biologie du cancer.
Ki67 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus MKI67 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de MKI67. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de MKI67. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de MKI67.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.