KCTD5 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-409961

Descripción general

KCTD5 codifica una proteína que contiene un dominio de tetramerización de canales de potasio y que funciona como adaptador en la homeostasis proteica dependiente de ubiquitina, actuando comúnmente junto con complejos de ligasa E3 basados en CUL3 para influir en la ubiquitinación y el recambio de sustratos. A través de estas interacciones, KCTD5 puede afectar la dinámica de redes de señalización y la proteostasis celular, incluidos procesos vinculados a la función neuronal y a vías sensibles al estrés. La regulación alterada de los adaptadores de la familia KCTD se ha asociado con una degradación proteica desregulada y con salidas de señalización perturbadas, rasgos recurrentes en la biología del cáncer y en trastornos neurobiológicos. En consecuencia, KCTD5 se estudia como un nodo modulador que conecta la maquinaria de ubiquitinación con el control de vías y el fenotipo celular.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO KCTD5 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen KCTD5 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del KCTD5 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de KCTD5 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína KCTD5.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en KCTD5 para la investigación de la señalización de KCTD5, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de KCTD5 críticos para la función de KCTD5
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de KCTD5 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido KCTD5 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido KCTD5 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus KCTD5. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR KCTD5 (h) y el plásmido HDR KCTD5 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología KCTD5 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana KCTD5 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.