KCNT1 Lentiviral Activation Particles (m): sc-432714-LAC

Das Mausgen **Kcnt1** kodiert **KCNT1**, einen natriumaktivierten Kaliumkanal (Slack/KNa1.1), der die intrazelluläre Na+-Dynamik mit der Membranrepolarisierung und der Adaptation der Feuerungsaktivität in Neuronen koppelt. Indem KCNT1 die Nachhyperpolarisation von Aktionspotenzialen formt und die Erregbarkeit reguliert, trägt es zur Netzwerksynchronisation und zur aktivitätsabhängigen Signalübertragung im zentralen Nervensystem bei. Die Kanalaktivität steht in Wechselwirkung mit Signalwegen, die die Ionenhomöostase, synaptische Transmission und neuronale Entwicklung steuern, und Störungen der KCNT1-Funktion wurden mit epilepsieassoziierten Mechanismen sowie breiteren neuroentwicklungsbezogenen Phänotypen in Verbindung gebracht. Diese Eigenschaften machen **Kcnt1** zu einem nützlichen Ziel, um zu untersuchen, wie KNa-Leitfähigkeit das Schaltkreisverhalten und aktivitätsabhängige Genprogramme in Mausmodellen und zellulären Systemen beeinflusst.

KCNT1 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Kcnt1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

KCNT1 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Kcnt1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen KCNT1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Kcnt1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.