Plásmido Doble Nickase (h) KCNE1: sc-404317-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)KCNE1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa KCNE1 (h) y el plásmido de doble nickasa KCNE1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a KCNE1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) KCNE1 | sc-404317-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) KCNE1 | sc-404317-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KCNE1 codifica una subunidad β transmembrana de paso único que modula la función de los canales de potasio dependientes de voltaje, en particular el complejo KCNQ1/Kv7.1, que conduce la corriente rectificadora tardía lenta (IKs). Al ajustar la cinética de compuerta del canal, el tráfico hacia la membrana y la sensibilidad farmacológica, KCNE1 ayuda a regular la repolarización cardíaca y la excitabilidad celular. Esta actividad vincula a KCNE1 con vías electrofisiológicas que controlan la duración del potencial de acción y la homeostasis iónica en cardiomiocitos y otros tejidos excitables. La variación genética o la expresión desregulada de KCNE1 se han asociado con susceptibilidad hereditaria a arritmias y con fenotipos auditivos, debido a sus efectos sobre el flujo de potasio en el corazón y el oído interno.
KCNE1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus KCNE1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de KCNE1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de KCNE1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con KCNE1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.