Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO karyopherin α3 (h): sc-410855
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- karyopherin α3 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique karyopherin α3, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: karyopherin α3 Antibody (B-1): sc-514101
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO karyopherin α3 (h) | sc-410855 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
KPNA3 code pour la karyophérine α3, un adaptateur de la famille des importines-α qui reconnaît les signaux classiques de localisation nucléaire et s’associe à l’importine β pour assurer un transport nucléocytoplasmique dépendant de la GTPase Ran à travers le complexe du pore nucléaire. En régulant l’entrée dans le noyau de facteurs de transcription, de médiateurs de signalisation et d’autres protéines cargo, KPNA3 influence les programmes d’expression génique, le contrôle du cycle cellulaire, les réponses au stress et la signalisation de l’immunité innée. Des altérations de la dynamique du transport nucléaire impliquant les voies des importines ont été associées à une prolifération dérégulée, à une signalisation inflammatoire et à des interactions hôte–pathogène dans divers contextes pathologiques. KPNA3 constitue donc une cible utile pour analyser comment l’import sélectif de cargos façonne les phénotypes cellulaires et les réseaux de transduction du signal.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO karyopherin α3 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène KPNA3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du KPNA3, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert KPNA3 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine karyopherin α3.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en KPNA3 pour l'étude de la signalisation de karyopherin α3, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de KPNA3 essentiels à la fonction de karyopherin α3
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de KPNA3 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le karyopherin α3 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le karyopherin α3 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus KPNA3. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le karyopherin α3 plasmide HDR (h) et le karyopherin α3 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie KPNA3 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles KPNA3 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.