Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
JunD Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400713
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- JunD El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico JunD, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: JunD Anticuerpo (D-9): sc-271938
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
JunD Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-400713 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
JUND codifica JunD, un factor de transcripción de tipo cremallera de leucina básica (bZIP) de la familia AP-1 que dimeriza con proteínas JUN y FOS para regular la expresión génica sensible a estímulos. JunD integra la señalización MAPK y señales inflamatorias para controlar la progresión del ciclo celular, la diferenciación, las respuestas al estrés oxidativo y la apoptosis mediante la modulación transcripcional de promotores y potenciadores. Contribuye a programas de cromatina y transcripción aguas abajo de citocinas y factores de crecimiento, influyendo en procesos como la remodelación de la matriz extracelular y la señalización inmunitaria. La actividad AP-1 desregulada en la que participa JunD se ha asociado con proliferación alterada, adaptación al estrés y fenotipos relacionados con tumores en múltiples contextos tisulares, lo que respalda su relevancia para estudios mecanísticos de enfermedades.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO JunD (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen JUND en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del JUND junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de JUND tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína JunD.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en JUND para la investigación de la señalización de JunD, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de JUND críticos para la función de JunD
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de JUND para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido JunD CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido JunD CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus JUND. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR JunD (h) y el plásmido HDR JunD (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología JUND para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana JUND definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.