Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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JRAB Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-410130
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- JRAB El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico JRAB, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: JRAB Anticuerpo (F-5): sc-376675
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
JRAB Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-410130 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
MICALL2 codifica JRAB (también conocido como MICAL-L2), un efector de Rab13 que actúa como andamiaje y enlaza la maquinaria de tráfico vesicular con la remodelación del citoesqueleto de actina en las uniones célula–célula. JRAB participa en la regulación de la organización de las uniones adherentes y estrechas, el reciclaje de membrana y el transporte polarizado, influyendo en la integridad de la barrera epitelial y la migración direccional. A través de interacciones con GTPasas Rab y componentes de las uniones, MICALL2 contribuye a vías que controlan la dinámica del citoesqueleto y el transporte intracelular. Se han descrito alteraciones en la expresión o regulación de MICALL2 en estudios sobre invasión tumoral y fenotipos relacionados con metástasis, lo que lo hace relevante para investigar mecanismos de pérdida de polaridad celular y motilidad.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO JRAB (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen MICALL2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del MICALL2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de MICALL2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína JRAB.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en MICALL2 para la investigación de la señalización de JRAB, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de MICALL2 críticos para la función de JRAB
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de MICALL2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido JRAB CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido JRAB CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus MICALL2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR JRAB (h) y el plásmido HDR JRAB (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología MICALL2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana MICALL2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.