JNK2 Double Nickase Plasmid (h): sc-400115-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das JNK2 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- JNK2 Double-Nickase-Plasmid (h) und JNK2 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf MAPK9 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: JNK2: sc-271133
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
JNK2 Double Nickase Plasmid (h) | sc-400115-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
JNK2 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-400115-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MAPK9 kodiert die c-Jun‑N‑terminale Kinase 2 (JNK2), eine stressaktivierte MAP‑Kinase, die Transkriptionsfaktoren wie c‑JUN und ATF2 phosphoryliert, um entzündliche Signalwege, Apoptose und die Zellzykluskontrolle zu koordinieren. JNK2 wirkt in der JNK/MAPK‑Kaskade nachgeschaltet von MAP3Ks und MAP2Ks und integriert Signale von Zytokinen, oxidativem Stress, ER‑Stress und genotoxischen Schäden, um kontextabhängige transkriptionelle Programme zu regulieren. Über die Modulation der AP‑1‑Aktivität sowie Crosstalk mit NF‑κB‑ und p53‑assoziierten Signalwegen beeinflusst MAPK9 Immunantworten, neuronale Signalübertragung und Gewebeumbau. Eine fehlregulierte JNK2‑Signalgebung wird mit stressadaptiven Prozessen in Krebs, neurodegenerativen Vorgängen sowie metabolischen und inflammatorischen Phänotypen in Verbindung gebracht, wodurch MAPK9 ein häufiges Ziel mechanistischer Signalwegstudien ist.
JNK2 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des MAPK9-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von MAPK9 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die MAPK9-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit MAPK9-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.