JNK1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (bovine): sc-437283

Descripción general

JNK1 (MAPK8) es una quinasa de proteínas activada por estrés de la familia de quinasas activadas por mitógenos (MAPK) que integra señales aguas arriba procedentes de citocinas, factores de crecimiento, especies reactivas de oxígeno y daño en el ADN para regular programas transcripcionales a través de dianas como c-Jun y otros componentes de AP-1. En células bovinas, JNK1 contribuye al control de la apoptosis, la señalización inflamatoria y la diferenciación al coordinar cascadas MAPK que se intersectan con NF-κB, la señalización de la insulina y respuestas asociadas a TGF-β. La actividad de JNK1 influye en resultados celulares como la proliferación, la migración y la remodelación de la matriz extracelular, por lo que es relevante en modelos de estrés tisular, desregulación metabólica y activación inmunitaria. La desregulación de la señalización de JNK se ha asociado de forma amplia con patologías inflamatorias y degenerativas, lo que respalda su utilidad como nodo mecanístico en investigaciones centradas en rutas de señalización.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO JNK1 (bovine) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen en líneas celulares bovine. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína JNK1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en para la investigación de la señalización de JNK1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de críticos para la función de JNK1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido JNK1 CRISPR/Cas9 KO (bovine) y el plásmido JNK1 CRISPR/Cas9 KO (bovine2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus . Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR JNK1 (bovine) y el plásmido HDR JNK1 (bovine2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.