Plásmido CRISPR de Activación (h) JMJD2C: sc-403282-ACT
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmdo de Activación CRISPR (h) JMJD2C es un sistema de activación de la trascripción mediante una activación sinérgica (SAM), diseñado para incrementar la expresión de un gen concreto
- Los Plásmdo de Activación CRISPR (h) JMJD2C incluyen los siguientes tres plásmidos, con un radio 1:1:1 : plásmido codificador de la nucleasa Cas 9 desactivada (dCas9), (D10A y N863A) fusionadas al dominio de transactivación VP64 y el gen de resistencia a blasticidina; plásmido codificador de la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 y el gen de resistencia a Higromicina; plásmido codificador de la secuencia diana específica de 20 nt de ARN y el gen de resistencia a puromicina.
- El complejo SAM resultante se une en un punto específico a unos 200 -250 nt aguas arriba del inicio de la transcripción del gen diana y ofrece un potente punto de reclutamiento de factores de transcripción para un eficiente incremento de la activación genica.
- Los gRNA codificados por el plásmido de activación CRISPR JMJD2C (h) y el plásmido de activación CRISPR JMJD2C (h2) se dirigen a regiones reguladoras distintas situadas aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción de KDM4C. Puede que haya uno o ambos diseños disponibles
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: JMJD2C Anticuerpo (D-4): sc-515767
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido CRISPR de Activación (h) JMJD2C | sc-403282-ACT | 20 µg | $397.00 |
KDM4C (JMJD2C) codifica una desmetilasa de histonas que contiene el dominio Jumonji C (JmjC) y que elimina principalmente marcas represivas de metilación como H3K9me3/me2, lo que favorece la apertura de la cromatina y la competencia transcripcional. Mediante la regulación dinámica de la metilación de histonas, JMJD2C influye en el control epigenético de programas de expresión génica vinculados a la progresión del ciclo celular, las respuestas al daño del ADN y redes de transcripción específicas de linaje. La actividad desregulada de KDM4C se ha asociado con estados aberrantes de cromatina observados en múltiples cánceres, donde la accesibilidad alterada de potenciadores (enhancers) y promotores puede reforzar circuitos transcripcionales oncogénicos. Como regulador nuclear de la cromatina, JMJD2C se estudia con frecuencia por sus funciones en la cooperación con factores de transcripción, la remodelación de la cromatina y el mantenimiento de la plasticidad epigenética en células humanas.
JMJD2C El plásmido de activación CRISPR (h) proporciona un enfoque específico y no destructivo para regular al alza la expresión endógena de KDM4C sin alterar la secuencia de ADN subyacente.
JMJD2C El plásmido de activación CRISPR (h) es un sistema mediador de activación sinérgica (SAM) de tres plásmidos diseñado para la regulación al alza transcripcional altamente eficiente y específica del locus KDM4C en líneas celulares humanas. El sistema se basa en una Cas9 catalíticamente inactiva (dCas9) que porta dos mutaciones inactivadoras (D10A y N863A) que eliminan la actividad nucleasa al tiempo que conservan la unión al ADN. Esta dCas9 se fusiona con VP64, un potente activador transcripcional, y se coexpresa con un gen de resistencia a la blasticidina para la selección. El segundo plásmido codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1, un complejo activador secundario que actúa en conjunto con dCas9-VP64, junto con un gen de resistencia a la higromicina. El tercer plásmido codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 que reclutan el complejo MS2-p65-HSF1 al sitio de activación, acompañado de un gen de resistencia a la puromicina. Los tres plásmidos se administran en una proporción de masa de 1:1:1 para una expresión equilibrada de todos los componentes del sistema.
Una vez ensamblado en el locus diana, el complejo SAM se une aproximadamente 200 pb aguas arriba del sitio de inicio transcripcional KDM4C, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma coordinada para reclutar la maquinaria transcripcional e impulsar la regulación al alza de la expresión endógena de JMJD2C. A diferencia de la Cas9 con actividad nucleasa, dCas9 no introduce roturas de doble cadena ni modifica la secuencia genómica, preservando el locus nativo KDM4C y permitiendo el estudio de las respuestas transcripcionales dependientes de JMJD2C en el locus endógeno, lo que la convierte en una herramienta valiosa para estudios funcionales, la identificación de genes diana y la modelización de la restauración de la vía JMJD2C en células tumorales con expresión de KDM4C silenciada o reducida.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.