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JAB1慢病毒激活颗粒(m) | sc-424107-LAC | 200 µl | $455.00 |
小鼠 Cops5 编码 JAB1(亦称 CSN5),它是 COP9 信号体的催化亚基;该复合体通过去 NEDD8 化(deneddylation)调控 cullin-RING 型泛素连接酶,从而控制蛋白质周转。通过精细调节依赖泛素的降解过程,JAB1 影响细胞周期进程、DNA 损伤应答以及应激适应性的转录程序,包括对 AP-1 活性的调控及与 CDK 抑制因子稳定性相关的通路。JAB1 还参与信号传导以及核—胞质穿梭等过程,从而影响细胞增殖与分化,因此与生长失衡和炎症相关的组织重塑模型密切相关。CSN5/JAB1 活性异常与致癌通路重编程及免疫信号改变有关,支持其在蛋白稳态与信号串扰机制研究中的应用价值。
JAB1 慢病毒激活颗粒(m)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Cops5 表达。
JAB1 慢病毒激活颗粒(m)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Cops5转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性JAB1表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Cops5 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。