ITM2A Plasmide Double Nickase (h): sc-406060-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ITM2A Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ITM2A Double Nickase Plasmid (h) e il ITM2A Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ITM2A. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ITM2A Plasmide Double Nickase (h) | sc-406060-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ITM2A Plasmide Double Nickase (h2) | sc-406060-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ITM2A (integral membrane protein 2A) è una glicoproteina transmembrana di tipo II appartenente alla famiglia dei domini BRICHOS, localizzata nelle membrane intracellulari e sulla superficie cellulare, con ruoli rilevanti nelle linee ematopoietiche e linfoidi. È stata collegata alla regolazione dei programmi di differenziamento cellulare e degli eventi di segnalazione associati alla membrana che modellano lo sviluppo e l’attivazione delle cellule immunitarie. L’espressione di ITM2A viene spesso studiata nel contesto del controllo trascrizionale e dell’impegno di linea, includendo i pathway che governano la maturazione delle cellule T e la differenziazione specifica dei tessuti. Alterazioni dell’abbondanza di ITM2A sono state riportate in molteplici contesti rilevanti per la malattia, a supporto del suo impiego come nodo molecolare per indagare la disregolazione immunitaria e stati trascrizionali associati al cancro.
ITM2A Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ITM2A nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ITM2A. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ITM2A. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ITM2A interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.