ITI-H4 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403358

Descripción general

ITIH4 codifica la cadena pesada H4 del inhibidor inter-α-tripsina (ITI-H4), una glicoproteína secretada enriquecida en el hígado que se asocia con la familia de los inhibidores inter-α y contribuye a la organización de la matriz extracelular y a la modulación de la actividad de proteasas en la circulación. ITI-H4 se vincula con la biología inflamatoria y de fase aguda, con una regulación influida por vías impulsadas por citocinas que remodelan la composición de las proteínas plasmáticas durante el daño tisular y las respuestas inmunitarias. Se han descrito alteraciones en la expresión y el procesamiento de ITIH4 en múltiples contextos de enfermedad, incluidos trastornos inflamatorios y firmas proteómicas asociadas al cáncer, lo que respalda su uso como diana de investigación mecanística y cercana a biomarcadores. Como factor soluble que impacta el entorno extracelular y las interacciones célula–matriz, ITIH4 es relevante para estudiar vías que gobiernan la inflamación, la remodelación tisular y la regulación del microambiente.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO ITI-H4 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen ITIH4 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del ITIH4 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de ITIH4 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ITI-H4.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en ITIH4 para la investigación de la señalización de ITI-H4, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de ITIH4 críticos para la función de ITI-H4
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de ITIH4 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido ITI-H4 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido ITI-H4 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus ITIH4. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ITI-H4 (h) y el plásmido HDR ITI-H4 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología ITIH4 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana ITIH4 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.