Plásmido Doble Nickase (m) IRF-1: sc-421146-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)IRF-1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa IRF-1 (m) y el plásmido de doble nickasa IRF-1 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Irf1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: IRF-1 Anticuerpo (E-4): sc-514544
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) IRF-1 | sc-421146-NIC | 20 µg | $410.00 |
El gen Irf1 de ratón codifica el factor regulador del interferón 1 (IRF-1), un factor de transcripción nuclear inducido por interferones de tipo I y tipo II que integra señales de citocinas y de detección de patógenos en programas de expresión génica. IRF-1 coordina funciones inmunitarias innatas y adaptativas al regular genes estimulados por interferón, la maquinaria de presentación de antígenos y redes transcripcionales proinflamatorias aguas abajo de JAK/STAT y vías de señalización relacionadas. También contribuye al control del ciclo celular y a la apoptosis, vinculando la activación inmunitaria con la regulación del crecimiento y las respuestas al estrés. La actividad desregulada de IRF-1 se ha implicado en alteraciones de la defensa antiviral, la inflamación mediada por el sistema inmunitario y las interacciones entre tumor e inmunidad, lo que convierte a Irf1 en un objetivo frecuente en estudios mecanísticos de inmunología y biología del cáncer.
IRF-1 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Irf1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Irf1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Irf1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Irf1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.