Plásmido Doble Nickase (m) IRAK-4: sc-435222-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)IRAK-4 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa IRAK-4 (m) y el plásmido de doble nickasa IRAK-4 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Irak4. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) IRAK-4 | sc-435222-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) IRAK-4 | sc-435222-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Irak4 codifica la cinasa 4 asociada al receptor de interleucina 1 (IRAK-4), una cinasa de serina/treonina que actúa como un nodo esencial de señalización proximal aguas abajo de los complejos del receptor tipo Toll y del receptor de IL-1 dependientes de MyD88 en células inmunitarias innatas de ratón. Tras la activación del receptor, IRAK-4 favorece el ensamblaje del mielosoma y eventos de fosforilación que propagan la señal hacia TRAF6, lo que culmina en la activación de las vías de NF-κB y MAPK y en la inducción de programas génicos inflamatorios. Este eje regula la producción de citocinas, la activación de leucocitos y las respuestas antimicrobianas, y se estudia ampliamente en el contexto de la inflamación desregulada y de fenotipos de señalización inmunitaria alterada. Por ello, IRAK-4 constituye un punto de entrada molecular clave para diseccionar la señalización de receptores de reconocimiento de patrones y el control transcripcional inflamatorio en modelos celulares y en vivo.
IRAK-4 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Irak4 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Irak4. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Irak4. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Irak4 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.