Plásmido Doble Nickase (h) Integrin αX/ITGAX/CD11c: sc-401765-NIC

ITGAX codifica la integrina αX (CD11c), que forma un heterodímero con la integrina β2 (CD18) para constituir el receptor del complemento 4 (CR4), un receptor clave de adhesión y reconocimiento en células dendríticas, monocitos, macrófagos y en subpoblaciones de neutrófilos. CD11c media la adhesión, la migración y la fagocitosis de los leucocitos al unirse a ligandos como partículas opsonizadas con iC3b y el fibrinógeno, coordinando la señalización “outside-in” que se conecta con la remodelación del citoesqueleto y con programas transcripcionales inflamatorios. Mediante señalización dependiente de integrinas y el diálogo (crosstalk) con receptores de la inmunidad innata, ITGAX contribuye a la captación de antígenos, a las interacciones célula–célula y a moldear las respuestas inmunitarias adaptativas. Las alteraciones en la expresión y la función de CD11c se estudian en contextos como la inflamación crónica, la autoinmunidad, la biología mieloide asociada a tumores y la vigilancia inmunitaria tisular desregulada.

Integrin αX/ITGAX/CD11c El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ITGAX en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ITGAX. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ITGAX. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ITGAX alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.