Plásmido Doble Nickase (m) Integrin αV/ITGAV/CD51: sc-421169-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)Integrin αV/ITGAV/CD51 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Integrin αV/ITGAV/CD51 (m) y el plásmido de doble nickasa Integrin αV/ITGAV/CD51 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Itgav. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Integrin αV/ITGAV/CD51 Anticuerpo (H-2): sc-376156
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) Integrin αV/ITGAV/CD51 | sc-421169-NIC | 20 µg | $410.00 |
Itgav codifica la integrina αV (ITGAV/CD51), una subunidad α que se asocia con múltiples integrinas β para formar receptores de ligandos de la matriz extracelular que contienen motivos RGD, entre ellos vitronectina, fibronectina y osteopontina. Mediante el ensamblaje de adhesiones focales y la interacción (crosstalk) con las vías de señalización FAK/Src, PI3K–AKT y MAPK, la integrina αV regula la adhesión, la migración, la supervivencia y la mecanotransducción celulares, y puede modular la activación del TGF-β latente en microambientes ricos en matriz. En tejidos de ratón, ITGAV contribuye a la angiogénesis, el tráfico de células inmunitarias, la reparación de heridas y la función de los osteoclastos, conectando la remodelación de la matriz extracelular con decisiones del estado celular. La desregulación de la señalización de integrinas que contienen αV se estudia ampliamente en fibrosis, inflamación e interacciones estromales asociadas a tumores, donde las alteraciones en la adhesión y la señalización dependiente de la matriz pueden moldear fenotipos invasivos y promotores de la supervivencia.
Integrin αV/ITGAV/CD51 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Itgav en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Itgav. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Itgav. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Itgav alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.