Plásmido Doble Nickase (h) Integrin αV/ITGAV/CD51: sc-400506-NIC

ITGAV codifica la integrina αV (CD51), una subunidad α que se asocia con múltiples integrinas β (p. ej., β3, β5, β6, β8) para formar receptores de ligandos de la matriz extracelular que contienen motivos RGD, como la vitronectina, la fibronectina y la osteopontina. Mediante señalización outside-in dependiente de la adhesión, las integrinas que contienen αV regulan la dinámica de las adhesiones focales, la remodelación del citoesqueleto y la migración celular a través de vías que incluyen FAK/SRC, PI3K–AKT y MAPK/ERK. ITGAV también contribuye a la mecanotransducción y puede modular la activación de TGF-β en el microambiente extracelular a través de heterodímeros específicos, influyendo en programas epitelio–mesénquima y en la remodelación tisular. La señalización desregulada de la integrina αV se investiga con frecuencia en contextos de invasión tumoral, angiogénesis, fibrosis y tráfico de células inflamatorias, lo que convierte a ITGAV en un blanco habitual en estudios de adhesión y señalización del microambiente.

Integrin αV/ITGAV/CD51 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ITGAV en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ITGAV. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ITGAV. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ITGAV alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.