Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Integrin αIIb/ITGA2B/CD41 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421160
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Integrin αIIb/ITGA2B/CD41 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Integrin αIIb/ITGA2B/CD41, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Integrin αIIb/ITGA2B/CD41 Anticuerpo (B-9): sc-365938
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Integrin αIIb/ITGA2B/CD41 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421160 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Itga2b codifica la integrina αIIb (CD41), que se asocia con la integrina β3 (CD61) para formar el receptor plaquetario de fibrinógeno αIIbβ3, un mediador central de la adhesión y la agregación plaquetarias. Tras la activación, αIIbβ3 experimenta señalización “inside-out” y “outside-in”, que conecta ligandos de la matriz extracelular como el fibrinógeno y el factor de von Willebrand con la remodelación del citoesqueleto, la dinámica de las adhesiones focales y vías de señalización dependientes de Src/FAK. En ratón, la expresión de Itga2b marca el compromiso con el linaje megacariocítico y favorece la producción de plaquetas y las respuestas hemostáticas. La desregulación de la señalización de integrinas y las alteraciones en la activación plaquetaria son relevantes de forma amplia para estudios de trombocitopenia, fenotipos hemorrágicos, trombosis asociada a inflamación y la interacción plaqueta–inmunidad en modelos de enfermedad vascular.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Integrin αIIb/ITGA2B/CD41 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Itga2b en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Itga2b junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Itga2b tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Integrin αIIb/ITGA2B/CD41.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Itga2b para la investigación de la señalización de Integrin αIIb/ITGA2B/CD41, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Itga2b críticos para la función de Integrin αIIb/ITGA2B/CD41
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Itga2b para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Integrin αIIb/ITGA2B/CD41 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Integrin αIIb/ITGA2B/CD41 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Itga2b. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Integrin αIIb/ITGA2B/CD41 (m) y el plásmido HDR Integrin αIIb/ITGA2B/CD41 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Itga2b para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Itga2b definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.