Plásmido Doble Nickase (h) Integrin α7/ITGA7: sc-401678-NIC

ITGA7 codifica la integrina α7, una subunidad α de unión a laminina que se asocia con β1 para formar un receptor principal de adhesión en el músculo esquelético y cardíaco. Este heterodímero conecta las señales de la matriz extracelular con el citoesqueleto de actina a través de redes de adhesión focal y de señalización de integrinas, coordinando la adhesión celular, la migración, la mecanotransducción y la estabilidad de las miofibras. La señalización dependiente de integrina α7 converge con vías que regulan la dinámica del citoesqueleto y la supervivencia, incluidas FAK/SRC y la modulación del eje MAPK/PI3K aguas abajo. La alteración de la expresión o la función de ITGA7 se ha asociado con fenotipos relacionados con distrofia muscular, una regeneración muscular deficiente y cambios en programas de adhesión e invasión de células tumorales, lo que la hace relevante para estudios de miogénesis y remodelación de la matriz extracelular.

Integrin α7/ITGA7 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ITGA7 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ITGA7. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ITGA7. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ITGA7 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.