Integrin α7/ITGA7 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421165

Descripción general

Itga7 codifica la integrina α7 (ITGA7), una subunidad α que forma un heterodímero con la integrina β1 para constituir un receptor de unión a laminina enriquecido en músculo esquelético y cardíaco. Este receptor de adhesión acopla la matriz extracelular al citoesqueleto de actina y contribuye a la adhesión, migración y diferenciación de los mioblastos, a la vez que modula la señalización a través de complejos de adhesión focal que reclutan FAK/Src, ILK y las vías PI3K–AKT y MAPK aguas abajo. La mecanotransducción dependiente de ITGA7 favorece la estabilidad de las fibras musculares y la organización de la unión neuromuscular, conectando señales de laminina extracelular con la remodelación intracelular del citoesqueleto. La alteración de la función o de la expresión de ITGA7 se asocia con un deterioro de la integridad muscular y fenotipos de tipo distrófico en sistemas modelo, por lo que constituye un nodo útil para estudiar el desarrollo y la regeneración del músculo y la señalización de la matriz extracelular.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Integrin α7/ITGA7 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Itga7 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Itga7 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Itga7 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Integrin α7/ITGA7.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Itga7 para la investigación de la señalización de Integrin α7/ITGA7, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Itga7 críticos para la función de Integrin α7/ITGA7
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Itga7 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Integrin α7/ITGA7 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Integrin α7/ITGA7 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Itga7. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Integrin α7/ITGA7 (m) y el plásmido HDR Integrin α7/ITGA7 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Itga7 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Itga7 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.