Partículas Lentivirales de Activación (m) Integrin α3/ITGA3/CD49c: sc-421161-LAC

Itga3 codifica la integrina α3 (ITGA3/CD49c), una subunidad α que se asocia con β1 para formar el receptor de laminina α3β1, coordinando la adhesión célula–matriz extracelular y la señalización bidireccional. A través de programas de adhesión focal y remodelación del citoesqueleto, ITGA3 influye en la migración celular, la polaridad y la organización de la membrana basal, integrando señales que convergen en la actividad de las vías FAK/Src, PI3K–AKT y MAPK. En tejidos de ratón, la integrina α3 se ha implicado ampliamente en la dinámica epitelial y endotelial, incluida la remodelación asociada a heridas y el desarrollo de órganos, y la señalización alterada de ITGA3 se estudia con frecuencia en contextos de inflamación, fibrosis tisular y biología de la invasión tumoral.

Las partículas de activación lentiviral Integrin α3/ITGA3/CD49c (m) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de Itga3 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral Integrin α3/ITGA3/CD49c (m) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción Itga3, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de Integrin α3/ITGA3/CD49c. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo Itga3 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.