Integrin α3/ITGA3/CD49c Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m2): sc-421161-KO-2

Descripción general

Itga3 codifica la integrina α3 (ITGA3/CD49c), una subunidad α que se asocia con β1 para formar la integrina α3β1, capaz de unirse a laminina y actuar como mediadora clave de la adhesión célula–matriz extracelular. A través de la señalización en las adhesiones focales, ITGA3 influye en la organización del citoesqueleto y activa vías downstream como FAK/Src, PI3K–AKT y MAPK para regular la migración, la supervivencia y la morfogénesis epitelial. En tejidos de ratón, la integrina α3 contribuye a las interacciones con la membrana basal y a la arquitectura de la barrera epitelial, lo que la vincula con procesos como la remodelación asociada a heridas y la polaridad celular. La alteración de la señalización mediada por integrinas ITGA3 se estudia con frecuencia en contextos de comportamiento invasivo, remodelación tisular asociada a inflamación y fenotipos del desarrollo de órganos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Integrin α3/ITGA3/CD49c (m2) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Itga3 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Itga3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Itga3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Integrin α3/ITGA3/CD49c.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Itga3 para la investigación de la señalización de Integrin α3/ITGA3/CD49c, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Itga3 críticos para la función de Integrin α3/ITGA3/CD49c
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Itga3 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Integrin α3/ITGA3/CD49c CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Integrin α3/ITGA3/CD49c CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Itga3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Integrin α3/ITGA3/CD49c (m) y el plásmido HDR Integrin α3/ITGA3/CD49c (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Itga3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Itga3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.