Plásmido Doble Nickase (m) Integrin α2/ITGA2/CD49b: sc-421159-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)Integrin α2/ITGA2/CD49b consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Integrin α2/ITGA2/CD49b (m) y el plásmido de doble nickasa Integrin α2/ITGA2/CD49b (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Itga2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Integrin α2/ITGA2/CD49b Anticuerpo (C-9): sc-74466
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) Integrin α2/ITGA2/CD49b | sc-421159-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) Integrin α2/ITGA2/CD49b | sc-421159-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen murino *Itga2* codifica la integrina α2 (ITGA2/CD49b), una subunidad α que forma un heterodímero con la integrina β1 para constituir un receptor de unión a colágeno y laminina que conecta la matriz extracelular con el citoesqueleto de actina. Mediante señalización de fuera hacia dentro y de dentro hacia fuera, ITGA2 modula el ensamblaje de las adhesiones focales y vías downstream, incluidas FAK/Src, PI3K–AKT y MAPK, dando forma a la adhesión, migración, supervivencia y mecanotransducción celulares. ITGA2 también contribuye a las interacciones de plaquetas y células inmunitarias con matrices ricas en colágeno, influyendo en las respuestas hemostáticas e inflamatorias. La desregulación de la señalización de la integrina α2 se ha asociado con remodelado tisular alterado y fenotipos invasivos en diversos modelos de enfermedad, lo que convierte a *Itga2* en un objetivo útil para diseccionar la comunicación célula–matriz.
Integrin α2/ITGA2/CD49b El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Itga2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Itga2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Itga2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Itga2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.