Plasmide Double Nickase (h) Inhibin α: sc-402958-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Inhibin α correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Inhibin α Double Nickase (h) et le plasmide Inhibin α Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant INHA. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Inhibin α Antibody (D-4): sc-365439
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Inhibin α | sc-402958-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Inhibin α | sc-402958-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
INHA code la sous-unité alpha de l’inhibine, qui s’associe en dimère avec des chaînes bêta d’inhibine pour former l’inhibine A ou l’inhibine B, des glycoprotéines sécrétées de la superfamille TGF-β qui antagonisent la signalisation de l’activine. En modulant la transcription dépendante de SMAD2/3, les inhibines régulent le rétrocontrôle des gonadotrophines (FSH), le fonctionnement de l’axe reproducteur et des processus plus larges tels que la prolifération et la différenciation cellulaires dans les tissus gonadiques et endocriniens. L’expression d’INHA et l’équilibre inhibine/activine sont impliqués dans la physiologie ovarienne, la fonction des cellules de la granulosa et la biologie des tumeurs des cordons sexuels et du stroma, et sont fréquemment évalués comme biomarqueurs en recherche reproductive et endocrinienne. La perturbation ou la dérégulation de cette voie peut modifier les programmes géniques liés à la stéroïdogenèse et les signaux extracellulaires au sein du microenvironnement gonadique.
Inhibin α Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus INHA dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de INHA. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de INHA. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de INHA.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.