Plasmide Double Nickase (h) INDOL1: sc-403856-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) INDOL1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide INDOL1 Double Nickase (h) et le plasmide INDOL1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant IDO2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) INDOL1 | sc-403856-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) INDOL1 | sc-403856-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
L’IDO2 humain (INDOL1) code une enzyme de la famille des indoléamine 2,3-dioxygénases, qui catalyse le métabolisme oxydatif du tryptophane le long de la voie de la kynurénine, influençant la disponibilité locale en acides aminés et la production de métabolites bioactifs en aval. En régulant le catabolisme du tryptophane, IDO2 peut moduler la signalisation immunitaire, l’équilibre rédox et les réponses au stress cellulaire, avec des effets dépendant du contexte sur la fonction des cellules présentatrices d’antigènes et sur les voies inflammatoires. Des altérations de l’activité de la voie de la kynurénine et de l’expression d’IDO2 ont été rapportées dans des contextes d’inflammation chronique et de dérégulation immunitaire, et font l’objet d’études pour leurs associations avec les interactions tumeur–système immunitaire et les processus neuro-inflammatoires. IDO2 constitue donc un nœud utile pour disséquer le contrôle métabolique des phénotypes immunitaires et les interactions entre voies dans des modèles cellulaires humains.
INDOL1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus IDO2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de IDO2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de IDO2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de IDO2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.