Importin-7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-403562

概要

IPO7 は、カリオフェリンβファミリーに属する核内輸送受容体 Importin-7 をコードしており、核膜孔を介して多様なカーゴタンパク質やリボ核タンパク質複合体を RanGTP 依存的に核内へ取り込む役割を担います。Importin-7 は、転写制御、リボソーム生合成、自然免疫シグナル伝達に関与する制御因子の核内局在を支え、核—細胞質間輸送を細胞周期の進行やストレス応答と結び付けています。さらに、シグナル伝達分子やクロマチン関連タンパク質の核内での利用可能性を制御することで、IPO7 は増殖やゲノム維持を司る経路に影響を及ぼし得ます。核内輸送の破綻は、がん遺伝子プログラムや宿主—病原体相互作用の変化と関連付けられており、そのため IPO7 は輸送依存的な表現型の機構研究に有用なノードとなります。

Importin-7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるIPO7遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、IPO7内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、IPO7のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Importin-7タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Importin-7シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、IPO7欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Importin-7の機能に不可欠なIPO7エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、IPO7ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Importin-7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびImportin-7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、IPO7遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Importin-7 HDRプラスミド（h）および Importin-7 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはIPO7ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のIPO7標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。