IL-9 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421119

Descripción general

El gen Il9 del ratón codifica la interleucina-9 (IL-9), una citocina pleiotrópica producida predominantemente por células Th9 que modula la proliferación, la diferenciación y la supervivencia de las células inmunitarias. La IL-9 señaliza a través del complejo del receptor de IL-9 para activar las vías JAK/STAT, con programas transcripcionales prominentes dependientes de STAT5 que configuran redes de citocinas y la inflamación tisular. En sistemas murinos, la IL-9 influye en la biología de mastocitos y eosinófilos, en las respuestas de la barrera mucosa y en la remodelación inmunitaria de las vías respiratorias, lo que la vincula con la inflamación alérgica y la desregulación inmunitaria. La actividad alterada de la IL-9 se estudia con frecuencia en modelos de inflamación de las vías respiratorias tipo asma, inmunidad impulsada por helmintos y microambientes inmunitarios asociados a tumores.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO IL-9 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Il9 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Il9 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Il9 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína IL-9.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Il9 para la investigación de la señalización de IL-9, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Il9 críticos para la función de IL-9
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Il9 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido IL-9 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido IL-9 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Il9. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR IL-9 (m) y el plásmido HDR IL-9 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Il9 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Il9 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.