IL-6 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-400390-LAC

O IL6 humano codifica a interleucina-6 (IL-6), uma citocina pleiotrópica que coordena as respostas imunes inata e adaptativa ao regular a sinalização de fase aguda, o recrutamento de leucócitos e a diferenciação de células B. A IL-6 liga-se ao IL-6R e ao correceptor gp130 para ativar a via JAK/STAT3, bem como as vias MAPK e PI3K-AKT, moldando programas transcricionais inflamatórios e decisões de sobrevivência celular. A desregulação da sinalização de IL-6 está associada à inflamação crônica, à patologia autoimune, à biologia das infecções e à inflamação associada a tumores, tornando o IL6 um nó central para o estudo de redes de citocinas e da comunicação imune–estromal. Em contextos de pesquisa, o IL6 é comumente analisado para conectar sinais extracelulares de estresse à expressão gênica a jusante dirigida por STAT, ao remodelamento metabólico e a estados funcionais mieloides/linfoides.

As Partículas de Ativação Lentivirais IL-6 (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de IL6 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais IL-6 (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição IL6, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de IL-6. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo IL6 e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.