IL-5 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-421112

개요

Il5는 Th2 관련 사이토카인인 인터루킨-5(IL-5)를 암호화하며, 호산구 계열의 분화(계통 결정), 생존, 활성화를 조율하고 마우스에서 B 세포의 증식 및 항체 클래스 전환을 지원합니다. IL-5는 IL-5 수용체(공통 β 사슬과 결합한 IL5RA)를 통해 신호를 전달하여 JAK/STAT, MAPK, PI3K 경로를 활성화함으로써 제2형 면역 프로그램과 과립구 이동을 형성합니다. IL-5 활성이 조절되지 않으면 호산구 매개 염증 및 알레르기성 기도 반응과 연관되므로, Il5는 점막 면역을 조절하는 사이토카인 네트워크를 분석하는 데 핵심적인 노드로 여겨집니다. 실험 모델에서 Il5 교란은 기생충(선충) 감염 반응 및 알레르기 염증 동안의 백혈구 분화, 화학주성 회로, 사이토카인 상호교차 작용을 연구하는 데 사용됩니다.

IL-5 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Il5 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Il5 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Il5의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 IL-5 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 IL-5 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Il5 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• IL-5 기능에 중요한 Il5 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Il5 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• IL-5 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 IL-5 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Il5 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  IL-5 HDR 플라스미드 (m) 및 IL-5 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Il5 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Il5 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.