Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) IL-4: sc-402914-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)IL-4 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa IL-4 (h) y el plásmido de doble nickasa IL-4 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a IL4. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: IL-4 Anticuerpo (HIL41): sc-12723
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) IL-4 | sc-402914-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) IL-4 | sc-402914-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El IL4 humano codifica la interleucina‑4 (IL‑4), una citocina pleiotrópica fundamental para las respuestas inmunitarias de tipo 2 y para la diferenciación de linfocitos T CD4+ vírgenes hacia el linaje Th2. La IL‑4 señala principalmente a través de complejos receptores que contienen IL‑4Rα para activar JAK1/JAK3 y STAT6, impulsando programas transcripcionales que promueven el cambio de clase de los linfocitos B a IgE, la polarización alternativa (M2) de los macrófagos y la modulación de la función de las células presentadoras de antígeno. Mediante el diálogo con vías como PI3K–AKT y MAPK, la IL‑4 configura los puntos de ajuste de la inflamación y la remodelación tisular en diversos microambientes inmunitarios. La actividad desregulada de IL‑4/STAT6 se estudia ampliamente en el contexto de la inflamación alérgica, el asma, la dermatitis atópica, la inmunidad frente a helmintos y la polarización inmunitaria asociada a tumores.
IL-4 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus IL4 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de IL4. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de IL4. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con IL4 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.