IL-3Rα Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421109
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IL-3Rα O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico IL-3Rα, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:IL-3Rα Anticorpo (C-5): sc-74522
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IL-3Rα Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421109 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Il3ra codifica a cadeia alfa do receptor de interleucina-3 (IL-3Rα, CD123), que confere especificidade de ligação ao ligante e forma um complexo de sinalização com a cadeia beta comum para transduzir sinais dependentes de IL-3. Em células hematopoéticas e imunes de camundongo, o IL-3Rα regula proliferação, sobrevivência e diferenciação, ativando as vias JAK/STAT, PI3K/AKT e MAPK, que modulam respostas da linhagem mieloide. Alterações na sinalização do IL-3Rα podem perturbar a homeostase e programas inflamatórios dirigidos por citocinas, tornando Il3ra um alvo útil para estudar a hematopoiese, estados de ativação mieloide e o crosstalk entre receptores de citocinas. O receptor também é amplamente utilizado como marcador de imunofenotipagem para investigar o desenvolvimento e a heterogeneidade funcional entre compartimentos hematopoéticos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO IL-3Rα (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Il3ra em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Il3ra, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Il3ra na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína IL-3Rα.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Il3ra para a investigação da sinalização de IL-3Rα, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Il3ra críticos para a função IL-3Rα
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Il3ra para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo IL-3Rα Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo IL-3Rα Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Il3ra. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo IL-3Rα Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR IL-3Rα (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Il3ra para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Il3ra definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.