Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) IL-2Rγ: sc-401876-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) IL-2Rγ correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide IL-2Rγ Double Nickase (h) et le plasmide IL-2Rγ Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant IL2RG. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: IL-2Rγ Antibody (A-10): sc-271060
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) IL-2Rγ | sc-401876-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) IL-2Rγ | sc-401876-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IL2RG code la chaîne gamma commune (IL-2Rγ, CD132), une sous-unité de signalisation essentielle partagée par plusieurs récepteurs de cytokines, notamment ceux de l’IL-2, de l’IL-4, de l’IL-7, de l’IL-9, de l’IL-15 et de l’IL-21. Après liaison de la cytokine, l’IL-2Rγ associe les complexes récepteurs à JAK3 et à la signalisation STAT en aval, coordonnant le développement, la survie et la différenciation effectrice des lymphocytes au sein des cellules T, des cellules B et des cellules NK. Cet axe s’intègre à des programmes plus larges de régulation immunitaire tels que la prolifération, la différenciation et le maintien homéostatique induits par les cytokines. La perturbation de la signalisation dépendante d’IL2RG est fortement associée à des défauts sévères des fonctions des cellules immunitaires adaptatives et innées, faisant d’IL2RG un gène clé pour les études mécanistiques de l’immunodéficience et de la signalisation des récepteurs aux cytokines.
IL-2Rγ Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus IL2RG dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de IL2RG. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de IL2RG. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de IL2RG.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.