IL-27Rα Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405846
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IL-27Rα O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico IL-27Rα, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:IL-27Rα Anticorpo (F-7): sc-376309
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IL-27Rα Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405846 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
IL27RA codifica a subunidade alfa do receptor de IL-27 (IL-27Rα, também conhecida como WSX-1/TCCR), uma subunidade de receptor de citocina que forma um complexo de sinalização com a gp130 para mediar as respostas à IL-27. A ativação do IL-27Rα desencadeia as vias JAK/STAT, principalmente STAT1 e STAT3, influenciando a diferenciação de células T, limitando a inflamação excessiva e modulando a função de células apresentadoras de antígeno. A sinalização dependente de IL27RA afeta o equilíbrio Th1/Th17, redes regulatórias e programas gênicos responsivos a interferon, que se cruzam com a comunicação entre a imunidade inata e adaptativa. A desregulação desse eixo tem sido associada a patologias mediadas pelo sistema imune e a alterações na defesa do hospedeiro, tornando o IL27RA um alvo útil para estudos mecanísticos em modelos de doenças inflamatórias e infecciosas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO IL-27Rα (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene IL27RA em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do IL27RA, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do IL27RA na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína IL-27Rα.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de IL27RA para a investigação da sinalização de IL-27Rα, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) IL27RA críticos para a função IL-27Rα
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos IL27RA para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo IL-27Rα Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo IL-27Rα Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus IL27RA. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo IL-27Rα Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR IL-27Rα (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia IL27RA para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo IL27RA definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.