Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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IL-23 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-429901
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IL-23 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico IL-23, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:IL-23 Anticorpo (C-3): sc-271279
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IL-23 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-429901 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Il23a codifica a subunidade p19 da interleucina-23 (IL-23), uma citocina heterodimérica que se associa à IL-12p40 para formar a IL-23 e sinaliza por meio do complexo do receptor de IL-23 para ativar as vias JAK/STAT, particularmente a STAT3. Em células mieloides, como células dendríticas e macrófagos, a IL-23 integra sinais de receptores de reconhecimento de padrões para reforçar programas inflamatórios e promover a imunidade do tipo 17. A IL-23 sustenta a expansão e a manutenção de células Th17 e de outras populações produtoras de IL-17, conectando o reconhecimento inato às respostas efetoras de IL-17A/F e IL-22. A atividade desregulada de Il23a/IL-23 é amplamente utilizada como um eixo mecanístico em modelos murinos de patologia autoimune e inflamatória, incluindo inflamação intestinal, dermatite semelhante à psoríase e autoimunidade do SNC.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO IL-23 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Il23a em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Il23a, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Il23a na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína IL-23.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Il23a para a investigação da sinalização de IL-23, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Il23a críticos para a função IL-23
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Il23a para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo IL-23 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo IL-23 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Il23a. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo IL-23 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR IL-23 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Il23a para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Il23a definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.