Plásmido Doble Nickase (m) IL-21R: sc-425627-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)IL-21R consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa IL-21R (m) y el plásmido de doble nickasa IL-21R (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Il21r. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: IL-21R Anticuerpo (H-11): sc-137120
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) IL-21R | sc-425627-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) IL-21R | sc-425627-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen Il21r de ratón codifica IL-21R, una subunidad de receptor de citocinas de tipo I que se empareja con la cadena γ común para formar el complejo receptor funcional de IL-21. La señalización a través de IL-21R activa las vías JAK/STAT, especialmente STAT3, coordinando programas transcripcionales que regulan la diferenciación de las células B y las respuestas de anticuerpos, las interacciones de los linfocitos T colaboradores foliculares y las funciones efectoras de los linfocitos T CD8 y las células NK. A través de estos circuitos de regulación inmunitaria, IL-21R contribuye a la dinámica del centro germinal, la recombinación de cambio de clase y las redes de citocinas inflamatorias. La actividad desregulada de IL-21/IL-21R se ha implicado en patología mediada por el sistema inmune y en alteraciones de la defensa del huésped, lo que respalda su uso como nodo mecanístico en estudios de autoinmunidad, inflamación crónica y remodelación inmunitaria asociada a infecciones.
IL-21R El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Il21r en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Il21r. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Il21r. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Il21r alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.