IL-20Rα Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405034
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- IL-20Rα El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico IL-20Rα, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: IL-20Rα Anticuerpo (EE09): sc-80065
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
IL-20Rα Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405034 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
IL20RA codifica la subunidad alfa del receptor de interleucina‑20 (IL‑20Rα), una subunidad de receptor de citocinas de tipo I que forma heterodímeros con IL20RB para constituir receptores funcionales de IL‑19, IL‑20 e IL‑24. La unión del ligando activa la señalización JAK/STAT, con fosforilación destacada de STAT3 y STAT1, lo que vincula a las citocinas de la familia IL‑20 con programas epiteliales y de queratinocitos que regulan la función de barrera, las respuestas antimicrobianas y la remodelación tisular. La señalización mediada por IL‑20Rα se interrelaciona con redes inflamatorias que moldean la expresión de citocinas y quimiocinas y puede influir en los estados de proliferación y diferenciación en tipos celulares sensibles. La desregulación de las vías de la familia IL‑20 se ha asociado con fenotipos inflamatorios cutáneos y con procesos más amplios mediados por el sistema inmunitario, lo que convierte a IL20RA en un nodo útil para estudios mecanísticos de la biología epitelial impulsada por citocinas.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO IL-20Rα (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen IL20RA en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del IL20RA junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de IL20RA tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína IL-20Rα.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en IL20RA para la investigación de la señalización de IL-20Rα, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de IL20RA críticos para la función de IL-20Rα
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de IL20RA para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido IL-20Rα CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido IL-20Rα CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus IL20RA. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR IL-20Rα (h) y el plásmido HDR IL-20Rα (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología IL20RA para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana IL20RA definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.