Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
IL-1ra Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401313
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- IL-1ra El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico IL-1ra, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: IL-1ra Anticuerpo (A-4): sc-374084
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
IL-1ra Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401313 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El IL1RN humano codifica el antagonista del receptor de interleucina 1 (IL‑1ra), un regulador secretado que inhibe de forma competitiva la unión de IL‑1α e IL‑1β al receptor de IL‑1 tipo I, atenuando así la señalización posterior dependiente de MyD88. Al limitar la activación inducida por IL‑1 de las vías de NF‑κB y MAPK, IL‑1ra modula programas transcripcionales que controlan la producción de citocinas, el reclutamiento de leucocitos y las respuestas inflamatorias de fase aguda. La actividad desregulada de IL1RN se asocia con una señalización innata aberrante y con cambios en el umbral basal de inflamación, lo que la hace relevante para estudios de autoinflamación, vías vinculadas a la artritis y, en general, la regulación de redes de citocinas. IL1RN también se utiliza como nodo marcador para analizar la dinámica del eje inflamasoma–IL‑1 y su control por retroalimentación en macrófagos, células epiteliales y compartimentos estromales.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO IL-1ra (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen IL1RN en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del IL1RN junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de IL1RN tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína IL-1ra.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en IL1RN para la investigación de la señalización de IL-1ra, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de IL1RN críticos para la función de IL-1ra
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de IL1RN para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido IL-1ra CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido IL-1ra CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus IL1RN. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR IL-1ra (h) y el plásmido HDR IL-1ra (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología IL1RN para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana IL1RN definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.