IL-1F9 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406176

Descripción general

IL36G codifica la interleucina-36 gamma (IL-1F9), una citocina de la familia de IL-1 que actúa como una alarmina derivada de células epiteliales y mieloides para amplificar las respuestas inmunitarias innata y adaptativa. Tras su activación proteolítica, IL-1F9 señala a través del complejo receptor de IL-36 (IL1RL2/IL1RAP) para activar las vías de NF-κB y MAPK, impulsando la expresión de quimiocinas y mediadores inflamatorios que reclutan y activan leucocitos. Este eje contribuye a la inmunidad de barrera en la piel y en las superficies mucosas y modula la inflamación asociada a Th17 mediante el crosstalk con los programas de IL-17/IL-23. La actividad desregulada de IL36G se ha implicado en trastornos inflamatorios de la piel como la psoriasis y en contextos más amplios de inflamación tisular crónica, lo que la convierte en un nodo útil para estudiar la amplificación de redes de citocinas y la señalización inmunitaria epitelial.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO IL-1F9 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen IL36G en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del IL36G junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de IL36G tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína IL-1F9.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en IL36G para la investigación de la señalización de IL-1F9, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de IL36G críticos para la función de IL-1F9
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de IL36G para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido IL-1F9 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido IL-1F9 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus IL36G. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR IL-1F9 (h) y el plásmido HDR IL-1F9 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología IL36G para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana IL36G definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.