IL-18Rβ Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421095

Descripción general

Il18rap codifica la proteína accesoria del receptor de IL-18 (IL-18Rβ), un correceptor esencial que se heterodimeriza con IL-18Rα para formar un complejo receptor funcional de IL-18 en las células inmunitarias. Tras la unión de IL-18, IL-18Rβ ayuda a reclutar MyD88 y la señalización posterior de IRAK/TRAF6, promoviendo la activación de las vías NF-κB y MAPK y la inducción de citocinas inflamatorias como IFN-γ. Este eje influye en la polarización Th1, la función efectora de las células NK y la activación mieloide, vinculando a Il18rap con la regulación de las respuestas inmunitarias innata y adaptativa. La señalización alterada de IL-18/IL-18R se ha implicado en procesos inflamatorios y autoinmunes, y se estudia con frecuencia en contextos de infección, inflamación estéril y modelos de inmunología tumoral en ratón.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO IL-18Rβ (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Il18rap en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Il18rap junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Il18rap tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína IL-18Rβ.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Il18rap para la investigación de la señalización de IL-18Rβ, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Il18rap críticos para la función de IL-18Rβ
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Il18rap para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido IL-18Rβ CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido IL-18Rβ CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Il18rap. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR IL-18Rβ (m) y el plásmido HDR IL-18Rβ (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Il18rap para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Il18rap definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.